乐享干货 | 细胞结团怎么办？不要慌，手把手教你养好细胞

在细胞培养时，大家经常会对细胞 “一言不合” 就要 “抱团” 的问题而忧愁。

今天，我们就从细胞结团的原因、结团细胞要怎么拯救以及如何避免细胞结团三个维度出发，手把手教你养好细胞 ~

为什么细胞总喜欢 “ 抱团取暖  ”

首先，我们要知道，细胞生长是相互联系的，大部分细胞都是成片生长的。有些细胞本身就具有结团倾向的生长特性，比如 NCI-H716、Caco-2、CaLu-3、SH-SY5Y、BT-474 等。那么问题来了，如何判断细胞生长过程中的结团是否正常？

无论是对本身就分散生长的细胞，还是对具有结团生长特性的细胞，都可以通过观察细胞轮廓来判断，如果细胞轮廓模糊，细胞透光性变差，甚至出现合胞体，同时伴随细胞碎片，这证明细胞已经衰老或者产生病变，状态不佳。

细胞结团通常是多种因素共同作用的结果，包括：

• 细胞系的来源
• 培养基的成分
• 消化时间控制不当（消化不完全或消化过度、消化过程中过于粗暴等）
• 去除玻璃碎片、碎屑等污染，避免带入到产品中

如何“拯救”结团细胞

如果细胞结团不影响细胞活率和倍增时间，可以不用特别在意细胞的结团。技术人员多次测试 WayneLVPro^TM HEK 293 生长结团情况，在 3.0×10⁶ cells/ml 密度以下的细胞结团情况基本不会影响细胞的瞬转和病毒包装。

如果出现了较大的细胞团，可以尝试以下方法：将细胞悬液收集到 15 mL 离心管中，静置一会儿，吸取上层细胞上清培养。

如何避免细胞结团

• 首先确认细胞的生长密度和状态，细胞生长密度不要太高，70%-80%即可进行传代。
• 传代操作前，使用缓冲液对细胞进行适当且全面地润洗，清除死亡的细胞团和部分堆叠杂质。
• 在消化过程中，需均匀慢速晃动培养器皿，以免局部胰酶浓度过高而影响传代。切勿用力摇动，这样容易造成细胞屑样脱落，增加细胞结团几率。
• 及时观察细胞状态，让细胞保持较好的生长状态。如果细胞本身状态不好或者已经发生老化，也容易造成细胞结团。
• 选用优质的细胞株也可以减少结团情况，比如 康晟生物的 WayneLVPro™ HEK 293 细胞株，让细胞传代事半功倍。

关于 WayneLVPro™ HEK 293 细胞株

WayneLVPro™ HEK 293 细胞株是康晟生物（Quacell ，乐纯生物旗下细胞培养品牌 ）通过扩增建库、高通量驯化筛选得到，具备可悬浮培养、快速生长、高转染效率、高病毒表达滴度特点的细胞株，瞬时转染效率可达 85% ，慢病毒感染滴度最高可达 3.0×10⁷ TU/mL 以上。

• 无血清，无动物来源悬浮培养体系；
• 支持产物高表达、高质量
• 中国地区独家商业化授权，符合全球知识产权法规

康晟生物还可提供一站式解决方案：Wayne293^® 系列培养基，搭配 WayneLVPro™ HEK293 细胞，为 HEK293 细胞的瞬转表达提供了完整的解决方案。

无论是瞬转表达蛋白或者病毒，我们都能满足客户的需求。

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