在抗体药物研发和免疫学研究中,ADCC (抗体依赖的细胞介导的细胞毒性作用)实验是评估抗体药物活性的重要手段之一。RAJI 细胞作为一种经典的靶细胞系,广泛应用于 ADCC 实验中。
然而,近期的研究发现,不同来源的RAJI细胞可能会导致 ADCC 实验结果出现显著差异,而细胞污染是其中的关键因素。
今天,我们就来深入探讨一下这个问题。
细胞系的“信任危机”
2016年,一位科学家在《自然-生物技术》杂志上发表了一篇关于新型基因编辑技术的论文。然而,随后多个实验室试图重复其实验却失败了。作者辩解说,实验无法重复的原因可能是细胞污染。虽然我们无法确切知道细胞污染是否是唯一原因,但这个案例却引发了科学界对细胞污染问题的广泛关注。
细胞污染并不是一个新问题。早在 2015 年,《科学》杂志就报道了细胞污染对科学研究的巨大影响。数据显示,在 2000-2015 年间,有超过 78 个细胞系出现了交叉污染的现象。其中,最著名的例子就是 HeLa 细胞系。这种源自一名黑人女性宫颈癌组织的细胞系,因其生命力顽强,被全球几乎所有实验室广泛使用。然而,也正是这种顽强的特性,让它成为细胞污染的“头号公敌”。据研究,超过 24% 的现有细胞系都受到 HeLa 细胞系的污染。

细胞污染:实验结果的“隐形杀手
细胞污染主要包括细菌、真菌、支原体等微生物污染。RAJI细胞由于其悬浮生长的特性,更容易受到污染。污染的细胞不仅会影响自身的生长和代谢,还可能干扰实验结果。例如,细菌污染可能导致细胞培养液变浑浊、pH值改变,影响细胞的正常生长;支原体污染则可能改变细胞的基因表达和代谢途径,导致实验数据的异常。
更糟糕的是,有些污染细胞甚至可能“伪装”成其他细胞系。比如,有些研究论文中使用的细胞系明明标注为人类细胞,但实际上却可能是大鼠或猪的细胞。这样一来,实验结果的可信度就大打折扣。

细胞来源:不同“出身”的差异
RAJI细胞最初由Pulvertaft RJV于1963年从一位11岁黑人男孩的左上颌骨 Burkitt 淋巴瘤中建立。如今,研究人员可以通过多种渠道获取 RAJI 细胞,比如从细胞库(如ATCC)购买标准细胞株,或者从其他实验室获取已传代的细胞。然而,不同来源的RAJI细胞在遗传背景、培养条件等方面可能存在差异。某些实验室在长期培养过程中可能对细胞进行过基因改造或筛选,导致细胞的表型和功能发生改变。这种差异就像给RAJI细胞戴上了不同的“面具”,让它们在实验中展现出不同的“性格”。
代次问题:细胞的“年龄之殇”
细胞代次是指细胞从原始组织分离后经过的传代次数。RAJI细胞在传代过程中,其生物学特性可能会逐渐发生变化。一般来说,细胞在早期传代(如10代以内)时,其特性相对稳定,能够较好地保留原始细胞的特征。然而,随着传代次数的增加,细胞可能会出现基因突变、染色体异常等情况,导致细胞的生长速率、代谢途径以及对实验处理的响应发生改变。就像人随着年龄的增长,身体机能会逐渐变化一样,RAJI细胞的“年龄”也会对其“行为”产生影响。
活性问题:细胞的“活力之源”
细胞活性是指细胞在生理和代谢方面的功能状态。RAJI细胞的活性受多种因素影响,包括培养条件、细胞密度、营养物质供应等。如果细胞在培养过程中处于低氧、营养不足或过度拥挤的环境中,其活性会降低,表现为增殖缓慢、代谢产物积累等。此外,细胞在复苏后的初期活性通常较低,需要经过一段时间的适应和恢复才能达到最佳状态。细胞活性的差异就像给实验结果加上了一层“滤镜”,让结果变得模糊不清。
我司不同来源RAJI的差异
由于我司对每个批次的PBMC均会进行ADCC/TDCC 杀伤检测,因而为了确保RAJI细胞在实验中的稳定性和可靠性,我们公司对内部不同来源的RAJI细胞进行了严格的验证。通过一系列的检测,我们发现不同来源的RAJI细胞在生长特性、基因表达和最终杀伤情况上存在显著差异,见下图,明显 RAJI-2 相对于 RAJI-1 和 RAJI-3 效果好很多。这些差异可能直接影响实验结果的准确性和可重复性。

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