乐享干货 | CHO细胞降温工艺对细胞表达量的影响

问：什么是降温工艺？

降温工艺（Temperature Shift）是一种常用于CHO细胞培养的优化策略，通过降低培养温度来改善细胞生长、代谢和蛋白质表达效率。该工艺在大规模重组蛋白生产中尤为重要。

降温工艺的优势

• 提高蛋白质产量：通过减少代谢压力和提高蛋白质折叠效率，显著提高重组蛋白的产量
• 改善蛋白质质量：低温有助于减少蛋白质的错误折叠和聚集，提高蛋白质的稳定性和生物活性
• 延长细胞生产周期：降低细胞代谢压力，延长细胞的生产周期，提高生产效率
• 减少细胞凋亡：低温有助于降低细胞凋亡率，提高细胞的存活率和稳定性

降温工艺的实验方法

降低培养温度是常用手段，但温度变化对表达量和质量的影响因表达宿主和表达蛋白的特性而异，难以预测，可采用全因子实验设计方法，在摇瓶实验中测试多个温度变化参数，确定最佳温度变化条件，再将结果应用于台式生物反应器和 1000 L生物反应器进行放大验证。

Figure 1: Full factorial temperature shift screen for Cell Line A in shake flasks and subsequent optimization in 2-L benchtop bioreactors.

QuaCell^®培养基在降温工艺中的表现

案例1：项目细胞CHO-K1，对照组为进口培养基组合，实验组包括QuaCell^®️ CellBest系列培养基，LeAd培养基，及国产竞品培养基A,B,C,D。

结果显示采用降温工艺后，表达量明显高于对照组，CellBest培养基在第五天降温至34.5℃的条件下，细胞表达量最高，较原工艺（不降温）提高60%。

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