乐享干货 | 做 HEK293 悬浮瞬转,你是不是也卡在这几步?

虽然 HEK293 细胞因易培养、转染效率高、蛋白表达能力强等优势,被视为瞬时转染的首选宿主,但在实际开展悬浮 HEK293 瞬转实验时,往往仍会受到多种工艺问题的制约,从而拖慢实验进度,诸如:

  • 细胞密度上不去
  • 转染效率低
  • 蛋白表达量低
  • 细胞毒性大

黑科技组合

培养基 + 转染试剂黄金搭档,提高实验效率

LeTrans 无血清培养基:细胞的 “高能营养餐”

  • 支持HEK 293悬浮细胞高密度增殖
  • 大幅度提高瞬时转染的蛋白表达量
  • 通用性强,可实现多项目细胞高表达

 

V MAX转染试剂:瞬时转染的“金钥匙”

具备高转染效率、广泛适用性、操作简便和安全性高的优势,可满足多种细胞的转染实验需求。

适用瞬转场景

  • 重组抗体快速制备
  • 功能蛋白高量表达
  • 多项目并行研发
  • 小批量蛋白试生产

应用案例

数据1:Wayne293® LeTrans Medium可支持HEK293悬浮细胞高密度增殖

将WayneLVPro™ HEK293 细胞接种至 LeTrans Medium、Wayne293 瞬转培养基、国产竞品A以及进口竞品B中,进行Batch培养。 结果显示,LeTrans Medium的最高细胞密度为1.03×107 cells/mL,细胞生长表现均优于其他培养基。

 

数据 2:按照QuaCell 转染试剂,竞品1转染试剂,竞品2转染试剂的说明书方法进行转染,转染后48小时显微镜下观察细胞荧光表达情况。QuaCell转染效率可以达到85%。

数据3: Wayne293® LeTrans Medium & Feed通用性强,可实现多项目细胞高表达

使用Expi293细胞传至 LeTrans 和原工艺国产竞品 A 培养基。选取高表达与低表达的质粒,同时做两种培养基瞬转实验对比,补料为对应的商业化补料,转染24h后,按照标准操作流程补糖补料,培养5天后收获测表达量。结果显示,与国产竞品A相比,LeTrans Medium在13个测试项目上的蛋白表达均有不同程度的提升,平均提高93.67%,其中项目6提高了150%

 

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